腸道真菌病檢測

基本信息

專科分類： 消化
檢查分類： 病原微生物檢查
適用性別： 男女均適用
是否空腹： 　非空腹
手術(shù)參考價： 25元
科　室： 消化

腸道真菌病檢測檢查簡介

腸道真菌病多繼發(fā)于其他疾病，可由假絲酵母菌等引起，也可由鵝口瘡或皮膚黏膜假絲酵母菌所引起。

腸道真菌病檢測檢查過程

1.病原學(xué)檢查由于真菌廣泛分布于自然界，甚至空氣中也常有孢子飛揚(yáng)，采集糞標(biāo)本和檢查操作中，應(yīng)盡可能減少污染，標(biāo)本要新鮮。有些真菌傳染性很強(qiáng)如莢膜組織胞漿菌，應(yīng)注意安全防護(hù)，以免造成實驗室人員感染。

直接鏡檢標(biāo)本

以10%氫氧化鉀或生理鹽水制片，高倍鏡下發(fā)現(xiàn)大量菌絲和孢子有診斷意義。對于雙相型真菌，僅查到孢子可能是正常帶菌。真菌性腸炎的6種常見病原多數(shù)情況下直接鏡檢即可鑒定，但孢子、菌絲和其他背景物質(zhì)有時相互混淆，不易辨認(rèn)。

①菌絲和孢子：菌絲粗細(xì)一致，除毛霉菌外均有分隔，可見不同角度的分支，細(xì)胞質(zhì)均勻，內(nèi)含大小不等的顆粒。孢子多為圓形或卵圓形，多數(shù)大小一致，邊緣整齊，可見細(xì)胞構(gòu)造。

②細(xì)胞壁：在氫氧化鉀溶液處理的標(biāo)本中，細(xì)胞壁常變寬，連接成弧狀，類似菌絲，但無菌絲的構(gòu)造。

③石棉體：比菌絲更細(xì)，不分節(jié)，無菌絲顆粒。

④植物纖維：未消化的食物殘渣，邊緣不整，無分支。

⑤脂細(xì)胞：圓形，構(gòu)造模糊，無細(xì)胞壁。

⑥磷脂小球：大小不一，形狀不整，無細(xì)胞構(gòu)造。

⑦氫氧化鉀結(jié)晶：雪花樣或珊瑚狀，邊緣呈鋸齒形，折光性強(qiáng)。

⑧小水皰：圓形，透亮，無細(xì)胞構(gòu)造。

染色鏡檢常用的染色方法

①革蘭染色：適用于念珠菌，孢子、菌絲染成藍(lán)色，但著色不均。

②過碘酸錫夫染色（PA5）：真菌孢子、菌絲均染成紅色。

③丫啶橙染色：熒光顯微鏡下真菌孢子呈亮綠色。

④吉姆薩染色和瑞特染色：適用于莢膜組織胞漿菌，染色前用甲醇固定，油鏡下菌體染成紅色，較小一端有出芽，菌體周圍有一圈莢膜樣結(jié)構(gòu)，為此菌的細(xì)胞壁。通常菌體位于巨噬細(xì)胞或單核細(xì)胞內(nèi)，少數(shù)位于細(xì)胞外。

⑤乳酸酚棉藍(lán)染色：適用于各種真菌培養(yǎng)涂片，菌體染成藍(lán)色。

真菌培養(yǎng)

糞標(biāo)本直接鏡檢通常不容易確定菌種，需參考糞培養(yǎng)結(jié)果，觀察菌落形態(tài)，再挑取菌落染色后鏡檢。常用沙保培養(yǎng)基和血瓊脂培養(yǎng)基。對于雙相型真菌還需在不同溫度下（25℃或37℃）分別培養(yǎng)，以便觀察其形態(tài)改變。

①大培養(yǎng)：是鑒別真菌的主要方法之一，可觀察菌落的生長情況。根據(jù)菌落的生長速度、形態(tài)、色澤等，初步判別菌種。

A.試管斜面：用白金環(huán)刺破瓊脂平面，分3點將標(biāo)本接種于試管斜面培養(yǎng)基上。此法不易污染，但菌落較小。

B.培養(yǎng)皿：分3點將標(biāo)本接種于平皿培養(yǎng)基中央，倒置后放恒溫箱中培養(yǎng)，每3天觀察1次菌落生長情況。

②小培養(yǎng)：將大培養(yǎng)中生長較好的菌落接種在玻片培養(yǎng)基上。培養(yǎng)1～3天后，在顯微鏡下觀察菌體的特征。

A.點片法：先將少許培養(yǎng)基成形于載玻片中央，再將菌種接種于培養(yǎng)基邊緣。覆以蓋玻片，置于有U形管的玻璃平皿中，培養(yǎng)后于不同時間取出鏡下觀察或染色鏡檢。

B.壓片法：將菌種接種在試管斜面或平皿培養(yǎng)基上，覆一蓋玻片，以便菌體向蓋玻片上生長，然后于適當(dāng)時間取出置于載玻片上鏡檢。

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