PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

基本信息

專(zhuān)科分類(lèi)： 腫瘤科
檢查分類(lèi)： 免疫檢查
適用性別： 男女均適用
是否空腹： 　非空腹
手術(shù)參考價(jià)： 45元
科　室： 腫瘤科

PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)檢查簡(jiǎn)介

PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)是T淋巴細(xì)胞與有絲分裂原在體外共同培養(yǎng)時(shí)，受到后者的刺激可發(fā)生形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)的變化，部分小淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為不成熟的母細(xì)胞，并進(jìn)行有絲分裂的試驗(yàn)方法。

PHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)檢查過(guò)程

操作方法：

1.取無(wú)菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml細(xì)胞培養(yǎng)液中，同時(shí)加入1000μg/m1PHA0.1m1，對(duì)照管不加PHA，將細(xì)胞置37℃、5%CO2培養(yǎng)3d，每天搖動(dòng)1次。

2.培養(yǎng)結(jié)束時(shí)吸棄大部分上清液，加入8.5g/LNH4Cl4ml混勻，置37℃水浴10min。

3.2500r/min離心10min，棄上清液，沉淀加5ml固定液，室溫作用5min。

4.2500r/min離心10min，棄上清液，留0.2ml沉淀細(xì)胞制片，迅速吹干。

5.吉姆薩染液染色10～20min，水洗，干燥。

6.油鏡計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞中轉(zhuǎn)化的細(xì)胞數(shù)，計(jì)算轉(zhuǎn)化率。

結(jié)果判斷：

1.淋巴母細(xì)胞的形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞核的大小、核與胞漿的比例、胞漿染色性及核的構(gòu)造與核仁的有無(wú)。

⑴成熟的小淋巴細(xì)胞：與未經(jīng)培養(yǎng)的小淋巴細(xì)胞大小一樣，為6～8μm，核染色致密，無(wú)核仁，核與胞漿比例大，胞漿染色為輕度嗜堿性。

⑵過(guò)渡型淋巴細(xì)胞：比小淋巴細(xì)胞大，約10～20μm，核染色致密，但出現(xiàn)核仁，此為與成熟小淋巴細(xì)胞鑒別要點(diǎn)。

⑶淋巴母細(xì)胞：細(xì)胞體積增大，約20～30μm，形態(tài)不整齊，常有小突出，核變大，核質(zhì)染色疏松，有核仁1～2個(gè)，胞漿變寬，常出現(xiàn)胞漿空泡。

⑷其它細(xì)胞：如中性粒細(xì)胞在培養(yǎng)72h后，絕大部分衰變或死亡呈碎片。

2.淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的計(jì)算按上述分類(lèi)檢查推片頭、體、尾三部分，計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞，算出百分率。轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞包括淋巴母細(xì)胞和過(guò)渡型淋巴細(xì)胞，未轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞指的是成熟的小淋巴細(xì)胞。在正常情況下，PHA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率為60～80%，如為50～60%則偏低，50%以下則為降低。

再根據(jù)結(jié)果得出正確的判斷。

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