T4淋巴細(xì)胞亞群

基本信息

專科分類： 生長發(fā)育檢查
檢查分類： 免疫檢查
適用性別： 男女均適用
是否空腹： 　非空腹
手術(shù)參考價(jià)： 25元
科　室： 生長發(fā)育檢查

T4淋巴細(xì)胞亞群檢查簡介

T淋巴細(xì)胞表面有多種抗原，其中簇分化(CD)抗原分類甚多，這些抗原除了標(biāo)記細(xì)胞的種類和分化階段外，同時(shí)也有一定的功能，或作為受體、黏附分子、信號傳遞成分等，可通過這些表面特征性抗原鑒別亞群。目前開展較多的是用抗分化抗原的單克隆抗體，如抗CD4單克隆抗體，對外周血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行檢測，根據(jù)出現(xiàn)陽性率，判定亞群分布。T淋巴細(xì)胞亞群是觀察機(jī)體細(xì)胞免疫水平的重要方法，對惡性腫瘤、自身免疫性疾病、免疫缺乏癥、血液系統(tǒng)疾病的診斷、治療及預(yù)后判斷有重要價(jià)值。T細(xì)胞亞群之間有相互制約和相互輔助的作用，任何一方的增多或減少皆影響另一亞群的形成失調(diào)。

T4淋巴細(xì)胞亞群檢查過程

（1）直接免疫熒光法

①取肝素抗凝外周血，用淋巴細(xì)胞分層液獲得單個(gè)核細(xì)胞，Hank液配成（1～2）×106細(xì)胞/ml。

②取1ml細(xì)胞懸液加入5ml塑料管中，離心2000r/min，2min，棄上清。

③加FITC-CD420μl，對照管加mIgG-FITC，4℃反應(yīng)30min。

④Hank液洗2次，2000r/min，2min。

⑤流式細(xì)胞計(jì)分析。

（2）間接免疫熒光法

①分離PBMC，調(diào)至（1～2）×106細(xì)胞/ml。

②取1ml細(xì)胞懸液于5ml塑料管中，離心2000r/min，2min，棄上清。

③加抗CD4單克隆抗體100μl，對照管加抗體稀釋液或正常小鼠IgG，4℃反應(yīng)30min。

④Hank液洗2次，離心2000r/min，2min，棄上清。

⑤加50μlFITC-IgG，4℃反應(yīng)30min。

⑥Hank液洗2次，2000r/min，2min。

⑦滴片，熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞計(jì)分析。

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