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方法:
1.潮氣呼吸法(連續(xù)吸入法):
(1)試劑的制備:氯化乙酰甲膽堿用生理鹽水稀釋,按濃度0.03mg/ml-16mg/ml,倍倍遞增稀釋,4℃保存?zhèn)溆?。用前需在室溫下放?0min。
(2)準(zhǔn)備好試驗(yàn)用儀器、設(shè)備和搶救用設(shè)備、藥品。受試者試驗(yàn)前停用支氣管擴(kuò)張藥,茶堿類、β2-受體興奮劑或抗膽堿藥物停用12h,抗組胺藥物停用48h,皮質(zhì)激素口服停用24h,吸入治療停用12h。
(3)受試者戴有孔面罩,并與霧化器出口銜接,霧化器的入口應(yīng)與壓縮空氣泵或氧氣瓶銜接,氣源壓力為3.5kgf/cm2,流量為5L/min-7L/min。
(4)試驗(yàn)前受試者休息15min,先測(cè)一秒鐘用力呼氣容積(FEV1)值兩次,取最高值作為基礎(chǔ)對(duì)照。
(5)在霧化器內(nèi)盛入5ml生理鹽水霧化,潮氣呼吸,吸入生理鹽水2min停止。測(cè)FEV1并與基礎(chǔ)值比較,降低不到10%,繼續(xù)進(jìn)行藥物試驗(yàn),如果降低10%以上,休息5min再吸入生理鹽水,重測(cè)FEV1,如結(jié)果與上次相同,表明稀釋劑本身可增加氣道反應(yīng)性,不再進(jìn)行藥物試驗(yàn)。
(6)藥物試驗(yàn):如果吸入生理鹽水氣道無反應(yīng),則從最低濃度開始順次吸入乙酰甲膽堿,潮氣呼吸,每一濃度吸2min,吸完后測(cè)FEV1等指標(biāo),直至FEV1較對(duì)照下降≥20%為止。
2.計(jì)量法(間斷吸入法):
(1)試劑制備、儀器準(zhǔn)備,受試者試驗(yàn)前的準(zhǔn)備同潮氣呼吸法。
(2)采用Devibiss:N.40霧化器,對(duì)氣溶膠排出量加以校準(zhǔn),每撳平均排放量0.003ml。一次試驗(yàn)用五個(gè)霧化器,分別加入生理鹽水和四級(jí)不同濃度的藥液。乙酰甲膽堿濃度為:3.125、6.25、25、50mg/ml。
(3)同方法一第3項(xiàng)內(nèi)容。
(4)霧化器口含管放置受試驗(yàn)者上、下牙齒之間,并戴鼻夾。先吸生理鹽水,呼吸三次,由平靜呼氣末(功能殘氣位)開始緩緩吸氣1s-2s至肺總量,屏氣3s后呼氣,吸氣開始由試者手控霧化器皮球,給生理鹽水一撳。60s后測(cè)FEV1兩次(差值須100m1),記錄其高值。
(5)按表順序依次吸入藥物(方法同上),每一劑量吸完后,測(cè)FEV1指標(biāo),立即再吸下一劑量,直至FEV1較吸入生理鹽水后FEV1降低20%或達(dá)到最高劑量,試驗(yàn)終止。吸入支氣管擴(kuò)張藥物。
(6)FEV1下降百分率計(jì)算公式:(基礎(chǔ)FEV1-吸藥后最高FEV1)/基礎(chǔ)FEV1×100%。
(7)繪制劑量反映曲線圖,并在圖中確定FEV1下降20%所需的藥物濃度。
說明:縱坐標(biāo)為FEV1(%基礎(chǔ)對(duì)照值),橫坐標(biāo)為吸入藥物濃度。a代表正常人曲線,b代表哮喘患者曲線。
結(jié)果判定:以FEV1較基礎(chǔ)對(duì)照值下降20%所需激發(fā)藥物的濃度(PC20FEV1)或含量(PD20FEV1)來判定試驗(yàn)結(jié)果。乙酰甲膽堿PC20,F(xiàn)EV18mg/ml或PD20FEV112.8μmol為試驗(yàn)陽性,大于上述數(shù)值為試驗(yàn)陰性。
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